丁苯酞對(duì)β淀粉樣蛋白(Aβ1-42)處理后U87細(xì)胞自噬性死亡的影響。方法方法將U87細(xì)胞分為Aβ組、Aβ+丁苯酞組和對(duì)照組(空白對(duì)照)。Aβ組細(xì)胞用Aβ1-42(20μmol/L)處理24 h;Aβ+丁苯酞組細(xì)胞用丁苯酞(10μmol/L)預(yù)處理0.5 h后再加入Aβ1-42(20μmol/L)處理24 h。采用MTT法測(cè)定細(xì)胞活力,檢測(cè)Caspase 3活性,采用CM-H2 DCFDA檢測(cè)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平,Western blotting檢測(cè)LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ蛋白表達(dá)。結(jié)果與對(duì)照組比較,Aβ組U87細(xì)胞活力顯著下降(P0.01);Aβ+丁苯酞組U87細(xì)胞活力顯著高于Aβ組(P0.05)。對(duì)照組、Aβ組和Aβ+丁苯酞組之間Caspase 3活性的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 與對(duì)照組比較,Aβ組U87細(xì)胞ROS水平顯著升高(P0.01);Aβ+丁苯酞組U87細(xì)胞ROS水平顯著低于Aβ組(P0.01)。與對(duì)照組比較,Aβ組U87細(xì)胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值顯著升高(P0.01);Aβ+丁苯酞組U87細(xì)胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值顯著低于Aβ組(P0.01)。結(jié)論丁苯酞通過抑制ROS介導(dǎo)的自噬性死亡發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。
是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（elisa）。往預(yù)先包被人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。
β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)elisa試劑盒說明書產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1、優(yōu)點(diǎn)明顯 產(chǎn)品具有靈敏度高、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)決定的產(chǎn)品好壞，我司產(chǎn)品具有穩(wěn)定的重復(fù)性，吸附性能好,空白值低，并適用于血清血漿 組織勻漿等多種樣本類型的檢測(cè)，方法簡單，操作方便，限度的節(jié)省了實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
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